г) Идентификация вируса в реакции торможения гемагглютинации

27. Схема (№ 3) постановки РТГЛ сводится к следующему:

В ряд лунок, начиная со второй, наливают по 0,2 мл физиологического раствора. Затем в первую и вторую лунки добавляют по 0,2 мл-заведомо известной приготовленной сыворотки в разведении 1 : 10. Во второй лунке пипетируют и переносят 0,2 мл смеси в третью и т. Д., до разведения 1 : 2560, из последней лунки удаляют 0,2 мл в дезинфицирующий раствор. После этого во все лунки вносят по 0,2 мл рабочего разведения (4 АЕ) испытуемого вируса. Доски с лунками встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 30 минут. После тридцатиминутного контакта сыворотки с вирусом, в каждую лунку добавляют по 0,4 мл 1 %-ной суспензии эритроцитов.

28- Для точности учета реакции торможения гемагглютинации ставят контроль:

1) Контроль сыворотки для исключения присутствия гемагглютининов к куриным эритроцитам (0,2 мл сыворотки в разведении 1 : 10, 0,2 мл физиологического раствора и 0,4 мл 1 %-ной суспензии эритроцитов),

2) Контроль избранной дозы вируса (0,2 рабочей дозы вируса (4 АЕ), 0,2 мл физиологического раствора и 0,2 мл 1 %-ной суспензии куриных эритроцитов),

3) Контроль стандартных диагностикумов (антигена 0,2 + 0,2 мл гомологичной сыворотки + 0,4 мл 1 %-ной суспензий эритроцитов),

4) Контроль эритроцитов на спонтанную агглютинацию (0,2 мл физиологического раствора и 0,2 мл 1 %-ной суспензии эритроцитов).

29. Титром сыворотки считается последнее разведение ее, давшее полную задержку гемагглютинации. Идентификацию возбудителя считают завершенной, если заведомо активная диагностическая сыворотка набора тормозит гемагглютинирующую активность испытуемого полевого штамма вируса в пределах целого или 1 /2—1 /8 титра.

30. На выделение и идентификацию вируса необходимо 3—10 дней.

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2020