ПОВЫШЕНИЕ ПРИЖИВЛЯЕМОСТИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ВОЗДЕЙСТВИЕМ НА ТОЧКИ АКУПУНКТУРЫ РЕЦИПИЕНТОВ

Тарадайник Т.Е.1,2, Тарадайник Н.П.1, Сингина Г.Н.1, Казеев Г.В.3,

Казеева А.В.3

1. ГНУ Всероссийский институт животноводства РАСХН, Подольск,

Московская обл., Россия

2. ФГБОУ Российская академия менеджмента в животноводстве,

Подольский р-он, Московская обл., Россия

3. ФГБОУ Российский государственный аграрный заочный университет, Ба-лашиха, Московская обл., Россия

Несмотря на достижения в развитии и коммерческом использовании метода трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота, приживляе-мость зародышей, особенно замороженно-оттаянных, варьирует в широ-ких пределах и обусловлена многими причинами (Mapletoft R.J., Hasler J.F., 2005). Поэтому остается актуальным вопрос повышения жизнеспо-собности эмбрионов и приживляемости их у реципиентов после нехирур-гической пересадки.

Установлено, что 80% всех эмбриональных потерь происходит до 17-го дня развития зародыша; с 17-го по 42-й день смертность составляет 10-15%, после 42-го дня – 5% и обусловлена целым рядом причин (Hansen P.J., 2002; O’Connor М., 2008).

Экспериментально доказано, что эмбрион способен корректировать несоответствие материнской среды (Ashworth C.J., Bazer F.W., 1989; Hansen P.J., 2002). Эмбрионы крупного рогатого скота продуцируют ин-терфероны, обладающие лютеотропным эффектом (Barros C.M. et al., 1992; Michael, D.D., 2006). Предпринимались попытки парентерального введе-ния альфа- интерферона после искусственного осеменения, с целью кор-рекции функции желтого тела (Barros C.M. et al., 1992). Однако для дости-жения ожидаемого эффекта необходимы условия для получения биологи-чески активных веществ, а также наличие достаточно больших объемов препаратов.

B этой связи весьма интересны экспериментальные данные об эф-фектах воздействия сверхмалых доз биологически активных соединений на организм (Бурлакова Е.Б., 1999). Установлено также, что вызывающая эффект доза лекарственного вещества может быть значительно снижена при введении в точки акупунктуры (ТА) (Казеев Г.В., 2000; Казеев Г.В. с соавт., 2001).

Ранее нами экспериментально был доказан эмбриотропный эффект кондиционированных эмбрионами in vitro сред при инъецировании их в точки акупунктуры коров в течение 10 дней после искусственного осеме-нения (Тарадайник Т.Е. с соавт., 2008; 2011). Известно, что при экстракор-поральном оплодотворении для улучшения культуральных условий разви-тия эмбрионов млекопитающих довольно давно и достаточно успешно ис-пользуются кондиционные клеточные и эмбриональные среды (Van Langendoncket A. еt al., 1996; Fujita T. et al. 2006). Кондиционная среда, по сути, является полноценным натуральным экстрактом, содержащим выра-батываемые эмбрионом факторы.

Цель исследований состояла в повышении приживляемости заморо-жено-оттаянных эмбрионов крупного рогатого скота при трансплантации.

Для достижения этой цели была поставлена задача: изучить влияние кондиционной эмбриональной среды, введенной в точки акупунктуры ре-ципиентов на приживляемость заморожено-оттаянных эмбрионов крупного рогатого скота.

Материал и методы. Кондиционированные среды получали посред-ством культивирования оплодотворенных in vitro ооцитов коров. Получен-ные на каждом этапе культивирования эмбрионов среды замораживали в пробирках по 220 мкл и хранили при температуре – 70оС до использова-ния. Получение и введение сред в точки акупунктуры проводили по мето-дике, описанной ранее (Тарадайник Т.Е. с соавт., 2008).

Для трансплантации использовали эмбрионы, полученные от коров- доноров голштинской породы со средней продуктивностью 10 тыс. кг мо-лока. Эмбрионы были заморожены в этиленгликоле с 4% бычьего сыворо-точного альбумина, что предусматривает прямую пересадку реципиенту непосредственно после оттаивания без оценки качества эмбриона.

В качестве реципиентов использовали телок случного возраста в спонтанном и синхронизированном цикле. Всего было пересажено 111 эм-брионов: 61 – реципиентам опытной группы (58 голов); 50 – реципиентам контрольной группы (47 голов): трем телкам в каждой группе эмбрионы были пересажены в оба рога матки. Перед трансплантацией эмбрионов животным обеих групп проводили сакральную эпидуральную анестезию 2%-м раствором новокаина. Пересадку эмбрионов проводили нехирурги-ческим методом глубоко в рог матки.

Реципиентам опытной группы сразу после трансплантации эмбриона вводили по 200 мкл кондиционной среды в ТА25 и/или ТА30. Локализа-ция: ТА25 − на дорсомедиальной линии тела в углублении между 2-м (не-подвижным) и 3-м (подвижным) хвостовыми позвонками; ТА30 − на меди-альной линии тела между корнем хвоста и анусом (атлас Казеева Г.В., 2000). Контрольным животным среду не вводили. Оценку эффективности проводили через 2 месяца после трансплантации эмбриона методом рек-тальной пальпации матки. Для статистического анализа изменчивости по качественным признакам и определения достоверности разности между процентами использовали критерий Стьюдента (Петухов В.Л. с соавт., 1985).

Результаты и обсуждение. Введение в точки акупунктуры телок- ре-ципиентов среды, кондиционированной in vitro эмбрионами крупного ро-гатого скота, позволило повысить показатель приживляемости замороже-но- оттаянных эмбрионов после нехирургической пересадки на 17,9% (Р<0,05). Показатель стельности в опытной группе составил 44,8%, что на 14,3% выше, чем в контроле (таблица). При этом двойни сохранились только у тех телок, которым была введена кондиционная среда.

Таблица

Влияние кондиционной эмбриональной среды на приживляемость
заморожено-оттаянных эмбрионов

Показатели

Опыт

(кондиционная среда)

Контроль

Количество пересаженных эмбрионов, n

61

50

Количество реципиентов, n

58

47

Стельных реципиентов, n

                                         %

26

44,8±6,5

14

29,8±6,7

Прижилось эмбрионов, n

                                         %

28

45,9±6,4*

14

28,0±6,3

*-Р<0,05

Как было отмечено выше, оценку качества оттаянных эмбрионов пе-ред пересадкой не проводили. Однако криоконсервации подвергают, как правило, эмбрионы отличного и хорошего качества. Следовательно, низ-кий процент приживляемости зародышей у интактных животных мог быть обусловлен не вполне удовлетворительным «качеством» реципиентов, в частности состоянием и активностью желтого тела, т.е. гормональным ста-тусом. Отнюдь не исключено влияние других факторов, о чем свидетель-ствует невысокий показатель стельности телок от искусственного осеме-нения. Полученные нами результаты позволяют предположить, что эм-бриональная кондиционная среда через ТА оказывает лютеотропное дей-ствие.

Выводы: Введение кондиционной эмбриональной среды в точки акупунктуры реципиентов после нехирургической пересадки повышает приживляемость заморожено-оттаянных эмбрионов на 17,9% (Р<0,05). По-лученные результаты свидетельствуют о возможности нового подхода к решению проблемы повышения эмбриональной выживаемости.

Литература: 1. Бурлакова Е.Б. // Российский химический журнал, 1999, Т. 43, № 5.- С.3-11. 2. Казеев Г.В. Ветеринарная акупунктура.- М., 2000.- 399 с. 3. Казеев Г.В, Казеева А.В, Ильина Г.В. //Материалы девятого Московского Междунар. ветеринарного конгресса.- М., 2001.- C.251-252. 4. Петухов В.Л. и др. Ветеринарная генетика с основами вариационной статистики.- М., 1985.- С.150-153. 5. Тарадайник Т.Е., Сингина Г.Н., Казеева А.В. и др. // Междуна-родный вестник ветеринарии. Тематический вестник: «Новые аспекты в био-технологии репродукции животных», 2008, № 3.- C.53. 6. Тарадайник Т.Е., Сингина Г.Н., Смирнова М.Л. // Проблемы биологии продуктивных живот-ных, 2011, № 2.- С.19-22. 7. Ashworth C.J. and Bazer F.W. // Biol Reprod., 1989, Vol. 40.- Р.425-433. 8. Barros C.M., Betts J.G., Thatcher W.W., Hansen P.J. // J. Endocrinol., 1992, Vol. 133.- P.175-182. 9. Fujita, T., Umeki H., Shimura H., Kugumiya K., Shiga K. // J. Reprod. Dev., 2006, Vol. 52(1).- P.137-142. 10. Hansen P.J. // J. Anim. Sci., 2002, Vol. 80(2).- Р.33-44. 11. Mapletoft R.J., Hasler J.F. //Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 2005, Vol. 24 (1).- P.393-403. 12. Michael, D.D. // Endocrinology, 2006, Vol. 7.- P.3571-3579. 13. O’Connor М. // Dairy and Animal Science at Penn State, 2008, Vol. 11(6).- P.1- 2. 14. Van Langendoncket A. et al. // An overview. Reprod., Nutrit., Devel., 1996, Vol. 36.-P.493-502.

INCREASE OF VIABILITY OF BOVINE EMBRYOS BY INFLUENCE ON ACUPOINTS OF RECIPIENTS

Taradaynik T.E.1,2, Taradaynik N.P.1, Singina G.N.1, Kazeev G.V.3,

Kazeeva A.V.3

1Institute of Animal Husbandry, Podolsk, Moscov region, Russia

2Russian Academy of Management in Animal Husbandry, Moscov region,

Podolsk, Russia

3Russian State Agrarian Correspondence University, Moscov region,

Balashikha Russia

The results of effective increase viability frozen - thawed bovine embryos at the recipients by means of injection in biologically active points microdozes of conditioned medium obtained by cultivation of bovine embryos in vitro.

The number of viability in treated and control groups was 45,9% and 28,0% respectively. There is shown that injection of conditioned medium in acupoints, after embryo transfer, raises level of viability of frozen-thawed bovine embryos by 17,9% in comparison with control (P<0,05).

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2021