Паразитология

Оглавление

Введение    4

ПИРОПЛАЗМИДЫ - отряд Piroplasmida    7

Семейство Babesiidae (Piroplasmidae)    8

Семейство Theileriidae    14

КОКЦИДИИДЫ - отряд Coccidiida    16

Семейство Eimeriidae    17

Семейство Sarcocystidae    21

Семейство Cryptosporidiidae    26

ЖГУТИКОВЫЕ (syn. Mastigophora)    28

Семейство Trypanosomatidae    29

Семейство Trichomonadidae    31

Семейство Monocercomonadidae    33

РЕСНИЧНЫЕ - тип Ciliophora (syn. Infusoria)    35

ПРОКАРИОТЫ - Prokaryota    37

Семейство Anaplasmataceae    37

Семейство Spirochaetacea    40

Контрольные вопросы и задания    42

Приложение

Морфологические особенности

паразитических простейших    45

Библиографический список    58

Введение

Протозоология (греч. protos - первый, первичный, zoon - животное) - раздел зоологии, изучающий одноклеточных животных и болезни, вызываемые ими у человека, сельскохозяйственных, промысловых и диких животных.

Тело простейших микроскопических размеров состоит из одной эукариотной клетки сложной структуры, способной выполнять все жизненные функции (питания, размножения, движения и др.). Простейшие имеют некоторое сходство с клетками высших животных, но оно не идентично. Принципиально клетка простейших состоит из оболочки, цитоплазмы с различными включениями и ядра.

Методом электронной микроскопии в цитоплазме простейших выявлены органеллы, свойственные любой клетке животных: метахондрии, эндоплазматическая сеть, комплекс Гольджи, рибосомы, фагосомы, ядра, вакуоли, специализированные органеллы -полярные кольца и коноид (у кокцидий, токсоплазм), роптрии и микронемы (у пироплазмид) и другие структуры.

Видовой состав простейших чрезвычайно обширен, а их морфологические и биологические особенности крайне разнообразны. В литературе пока нет четких сообщений о числе паразитических видов. По мнению многих ученых, таковых насчитывается свыше 10 тысяч (М. В. Крылов, 1994). Они паразитируют у самых разнообразных представителей животного мира, в том числе и у других простейших, заселяя практически все группы эукариот. Среди них немало видов, вызывающих тяжелые заболевания животных и человека, нередко с высокой летальностью.

В пособии нас будут интересовать лишь паразитические простейшие, имеющие непосредственное и ветеринарное, и медицинское значение.

Паразитические простейшие обитают в различных органах и тканях животного организма. Они локализуются в плазме и эритроцитах крови, в клетках эпителия кишечника, печени и почек, в желудке и кишечнике, в тканях центральной нервной системы, в половых органах, мышцах, подкожной клетчатке и т. д. При этом у многих паразитов наблюдается видовая приспособляемость к паразитированию в определенной ткани или органе хозяина, но есть виды, па-разитирующие одновременно во многих органах и тканях.

Разнообразны и биологические особенности простейших. Часть их развивается в организме лишь одного хозяина (эймерии и др.), другие нуждаются в смене хозяев (пироплазмиды), один из которых является переносчиком (членистоногие). Обычно один вид простейших патогенен только для одного вида животного, но есть виды простейших, которые могут инвазировать и несколько видов животных (токсоплазмы и др.).

Следует отметить и такую особенность. Иммунитет при протозойных заболеваниях существенно отличается от такового при бактериальных болезнях. Обычно после того, как животное переболело, возбудитель полностью не исчезает из организма, и животное на долгое время становится его носителем, но вместе с тем остается невосприимчивым к данному заболеванию (нестерильный иммунитет - премуниция). При ослаблении вирулентности паразита или полном его исчезновении из организма хозяина животное вновь оказывается восприимчивым к заражению.

Целый ряд протозойных болезней, в том числе пироплазмидозы, кокцидиидозы и другие, в клиническом проявлении сходны с некоторыми вирусными и бактериальными заболеваниями (лептоспироз, сибирская язва, инфекционная анемия лошадей и др.). Поэтому правильная диагностика является первым звеном в цепи мероприятий по профилактике протозойных заболеваний. Ведущим элементом здесь является установление этиологического фактора, основанного на распознавании простейшего - возбудителя болезни.

Систематическое положение одноклеточных организмов на протяжении многих лет неоднократно претерпевало изменения и, по мнению некоторых зоологов, в настоящее время не может считаться окончательно разработанным. Авторы учебно-методического пособия придерживаются систематики возбудителей протозойных болезней животных и человека, разработанной Санкт-Петербургскими зоологами (М. В. Крылов, А. А. Добровольский и др.), обобщившими многочисленные материалы отечественных и зарубежных школ протозоологов (рис.). Она отражает современные научные достижения в изучении простейших, но в то же время является компромиссной, так как нет единого мнения относительно ранга отдельных таксонов зоологической номенклатуры. В связи с этим некоторые виды простейших - возбудителей болезней, рассматриваемые в учебниках прошлых лет как самостоятельные, в данном издании представлены как синонимы новых названий. Это касается и термина Protozoa. Ранее все одноклеточные организмы объединялись в подцарство (или тип) Protozoa. В настоящее время если этот термин и употребляется, то как экологический, а не систематический.

1

Рис. Классификация паразитических простейших– возбудителей протозойных заболеваний

ПИРОПЛАЗМИДЫ - отряд Piroplasmida

Пироплазмиды - одноклеточные беспигментные организмы, паразитирующие у представителей всех видов позвоночных животных. Являются кровепаразитами, локализуются в клетках крови, в клетках ретикуло-эндотелиальной системы, иногда и в плазме крови. Развитие пироплазмид осуществляется с обязательным участием переносчиков.

Пироплазмиды полиморфны (прил., рис. 2), размеры их изменчивы (от 0,6 до 7 мкм), что зависит от вида паразита, стадии его развития и воздействия иммунной системы хозяина; по форме: овальные, грушевидные, амёбовидные, кольцевидные, запятовидные, кресто-образные и др. Поглощение питательных веществ осуществляется пиноцетозом. Движение амебоидное. Размножение в эритроцитах осуществляется путём простого деления (на два) или почкования, а в лимфоидно-макрофагальных клетках - путём множественного деления (шизогония = мерогония).

Пироплазмиды видового состава паразитируют исключительно в организме определённого вида животных, то есть они строго специфичны в отношении своих хозяев. Передача паразитов от одного животного к другому осуществляется с помощью членистоногих (клещей сем. Ixodidae), отдельные виды которых способны «культивировать» различные виды пироплазмид.

Циркуляция пироплазмид в клещах осуществляется по трём типам: трансовариальному, трансфазному и при прерывистом питании.

При трансовариальном типе паразиты, размножаясь в клещах, внедряются в яйцевые фолликулы и через яйца, откладываемые самкой, проникают в следующее поколение клещей; передача паразитов животным происходит каждой кровососущей стадией (личинками, нимфами, имаго) или одной (двумя) стадией метаморфоза клещей. Так обеспечивается продолжительная циркуляция паразитов от генерации к генерации клещей через яйца. Эта способность свойственна представителям сем. Babesiidae.

При трансфазном типе циркуляции клещи воспринимают паразитов от больного животного, питаясь на нём в стадии личинки или нимфы, а передают их восприимчивому животному в последующей нимфальной или имагинальной стадии, то есть передача осуществляется только по ходу метаморфоза. Трансфазная передача свойственна семейству Theileriidae.

При прерывистом питании клещи в пределах одной половозрелой стадии вначале питаются на больном животном, а затем, переползая на восприимчивое животное, передают ему возбудителей либо отпадают, через несколько дней нападают на другое животное и, начав питаться снова, заражают его.

В отряд Piroplasmida входят семейства: Babesiidae (syn. Piroplas-midae), Theileriidae и Nicolliidae (syn. Nuttalliidae) с единственным родом Nicollia. В пособии мы не рассматриваем представителей последнего семейства, поскольку они на территории России не регистрируются. Но считаем необходимым отметить, что николлииды встречаются у некоторых видов кошачьих, грызунов, птиц, человека и имеют ряд характерных особенностей. От организмов, объединяемых в сем. Babesiidae, они отличаются отсутствием трансовариальной передачи у беспозвоночных хозяев, а от представителей сем. Theileriidae - отсутствием пре-эритроцитарных внутриклеточных многоядерных стадий развития в позвоночном хозяине. Размножаются николлииды в эритроцитах бинарным делением или почкованием, полиморфны; характерны стадии, состоящие из 4 особей, иногда напоминающие по форме мальтийский крест.

Семейство Babesiidae (Piroplasmidae)

Передача инвазии осуществляется клещами трансовариально; преэритроцитарные многоядерные стадии развития в позвоночном хозяине отсутствуют.

Род Babesia. Для представителей рода характерны развивающиеся в эритроцитах парные грушевидные стадии, соединённые тонкими цитоплазматическими мостиками. Размеры грушевидных стадий, расположение их в эритроцитах и относительно друг друга служат ведущим диагностическим признаком вида бабезий (прил., рис. 3, 4).

В данном роде представлены виды пироплазмид, диагностируемые в России как возбудители заболеваний (бабезиидозов) животных.

В. bovis (Fransaiella colchica) - паразитирует у крупного рогатого скота. Расположение паразитов в эритроцитах обычно центральное. Угол расхождения парных грушевидных стадий, как правило, тупой, размер их обычно равен радиусу эритроцита; размеры других стадий варьируют в пределах 1,4-2,8 x 1,3-1,5 мкм.

В одном эритроците чаще встречается 1-2, реже 3-4 паразита. Поражённость эритроцитов редко превышает 4-5 %.

В. bigemina (Piroplasma bigeminum) - паразитирует у крупного рогатого скота. Расположение паразитов в эритроцитах обычно центральное. Угол расхождения парных грушевидных стадий острый, размер их превышает радиус эритроцита; размеры других стадий такой же величины.

В одном эритроците чаще 1-2 паразита, реже - до 3. Поражённость эритроцитов в пределах 10-15 %.

В. divergens (Babesiella bovis) - паразитирует у крупного рогатого скота. Расположение в эритроцитах периферийное - бабезии как бы сидят на эритроците. Угол расхождения между парными грушевидными стадиями тупой, размер их меньше радиуса эритроцита; размеры других стадий 1,5-2,4 x 0,4-1,12 мкм.

В одном эритроците до 4 бабезий. Заражённость эритроцитов 7-15 %, но может достигать 40 %.

В. ovis (Babesiella ovis) - паразитирует у овец и коз. Расположение в эритроцитах периферийное. Угол расхождения парных грушевидных стадий тупой, размер их меньше радиуса эритроцита; размеры других стадий 1,0-2,5 мкм.

В одном эритроците 3-4 паразита. Заражённость эритроцитов от 1 до 5 %.

В. motasi (Piroplasma ovis) - паразитирует у овец и коз. Расположение в эритроцитах центральное. Угол расхождения пар-ных грушевидных стадий острый, размер их равен или превышает радиус эритроцита; размеры других стадий 2,5-4,0 мкм.

В одном эритроците от 1 до 4 паразитов. Заражённость эритроцитов достигает 15-45 %.

В. caballi (Piroplasma caballi) - паразитирует у лошадей. Расположение в эритроцитах центральное. Угол расхождения парных грушевидных стадий острый, размер больше радиуса эритроцита

(2,5-4,0 мкм).

В одном эритроците от 1 до 3 бабезий. Заражённость эритроцитов от 0,5 до 10 %.

В. canis (Piroplasma canis) - паразитирует у собак. Расположение парных грушевидных стадий центральное, угол расхождения острый, размер больше радиуса эритроцита.

В одном эритроците от 1 до 16 бабезий. Заражённость эритроцитов достигает 6-10 % (прил., рис. 13).

В. trautmanni (Piroplasma suis) - паразитирует у свиней. Расположение парных грушевидных форм центральное, угол расхождения острый, размер больше радиуса эритроцита (до 6 мкм). На пике паразитемии преобладают грушевидные формы (до 90 %).

В одном эритроците от 1 до 8 бабезий. Заражённость эритроцитов высокая - до 65 %.

Развитие в организме позвоночных. Клещи со слюной инокулируют животным инвазионные формы бабезий - «спорозоиты». («Спорозоиты» - не верный, но устоявшийся термин, поскольку истинные спорозоиты образуются у споровиков в результате полового размножения, которого, по мнению большинства протозоологов, нет у пироплазмид). «Спорозоиты» (мерозоиты) проникают в эритроциты, превращаются в трофозоиты (подвижные вегетативные стадии амебовидной формы с псевдоподиями), которые питаются, развиваются и размножаются бинарным делением или почкованием. Образовавшиеся особи - мерозоиты после разрушения эритроцита внедряются в новые эритроциты, превращаются в трофозоиты и вновь делятся, образуя новые ме-розоиты и обусловливая развитие паразитемии и болезненного процесса у животных.

Развитие в клещах. Бабезииды, попав в организм клеща вместе с эритроцитами позвоночного хозяина, первоначально проходят бинарное и множественное деление в просвете кишечника и его эпителиальных клетках. Образовавшиеся сигаровидные и булавовидные стадии мигрируют в различные органы, где продолжается их деление. В слюнных железах формируются мелкие одноядерные инвазионные формы - «спорозоиты». Бабезии в яйцевых клетках при дальнейшем метаморфозе клеща обеспечивают трансовариальную их передачу клещам следующего поколения.

Д и а г н о с т и к а. Для обнаружения бабезиид исследуют мазки крови. Кровь берут из периферических сосудов (кончика уха или хвоста). На месте взятия крови выстригают волосы, очищают кожу ватным тампоном, смоченным водой, затем спиртовым тампоном, обезжиривают кожу эфиром, дают высохнуть и только после этого делают прокол поверхностной вены стерильной иглой или надрез кожи ножницами или лезвием бритвы. Для исследования обязательно берут первую каплю крови, так как в ней содержится значительно больше кровепаразитов, нежели в последующих каплях. Кроме того, делают дополнительно 2-3 мазка.

От погибших животных делают мазки из крови при разрезе селезенки, печени, почек, из капилляров головного и костного мозга, но не позже 4-6 часов после смерти, так как после этого срока в жаркие дни возможен полный лизис паразитов. В этих случаях рекомендуется делать мазки из крови периферических сосудов венчика копыт или конца культи хвоста, где кровепаразиты сохраняются дольше.

Для приготовления тонких мазков обезжиренным предметным стеклом прикасаются к выступившей капле крови, располагая ее ближе к концу стекла. Суженным концом шлифованного стекла прикасаются к капле (кровь должна равномерно распределиться между стеклами) и под углом 45° продвигают его по предметному стеклу, пока капля не иссякнет. Равномерность нажима и продвижения шлифованного стекла обеспечивает приготовление качественного мазка, постепенно истончающегося и оканчивающегося в виде бахромы (прил., рис. 1).

Приготовленные мазки высушивают (не менее 10 мин при комнатной температуре), этикетируют (простым карандашом, иглой, скальпелем) и фиксируют (метиловым спиртом 3-5 мин или спирт-эфиром 10 мин), погружая мазки в фиксирующие жидкости или наслаивая их на мазок высоким слоем.

Фиксированные мазки окрашивают, используя различные краски. Наиболее распространенный метод окрашивания - по Романовскому - Гимза. Используется готовый раствор краски одноименного названия. Перед употреблением краску разбавляют из расчета 1 капля на 1 мл дистиллированной воды. Различные серии краски по своим красящим свойствам не одинаковы. Поэтому иногда приходится брать ее 2-3 капли на тот же объем воды, но не более, так как в концентрированных растворах краска выпадает в осадок. Рабочий раствор краски готовят непосредственно перед употреблением. На окраску одного мазка необходимо 4-5 мл красящего раствора.

Окрашивание проводят в кюветах (чашках Петри), покрывая мазки высоким слоем краски или подслаивая краску под перевернутые мазки, размещенные на спичках (без головок) или отрезках предметных стекол; второй способ окраски предпочтителен - он предохраняет мазок от загрязнения выпадающим осадком краски. Экспозиция окрашивания в пределах 15-60 мин, что зависит от качества краски, поэтому время окрашивания устанавливается экспериментальным путем для каждой партии (флакона) краски. После окраски мазки споласкивают дистиллированной водой, ставят почти вертикально на фильтровальную бумагу и выдерживают до полного высыхания; в случаях появления на бумаге следов краски мазки вновь ополаскивают и ставят для высушивания.

Исследование мазка начинают под малым увеличением микроскопа. В наиболее тонкой части мазка (в концевой части или в его бахромке) находят хорошо окрашенный участок, который затем исследуют под иммерсионным объективом с окуляром х 7 или х 10. Просматривают несколько полей зрения - до обнаружения типичных форм кровепаразитов.

Правильная окраска узнается по внешнему виду. Макроскопически мазок должен быть окрашен в розовый цвет с незначительным фиолетовым оттенком. Пироплазмиды отчетливо выделяются на розовом фоне эритроцитов в виде контурирующих образований, состоящих из протоплазмы сине-фиолетового цвета, иногда с вакуолью в центре, и ядра в виде разнообразных по форме включений хроматина красно-рубинового или красно-фиолетового цвета.

В перекрашенных мазках эритроциты синего цвета, и в них трудно различить паразитов. Для обесцвечивания мазки погружают на 1-2 секунды в 80°-ный спирт или воду, подкисленные уксусной кислотой (на 100 мл спирта или воды - 2 капли кислоты). Вынутые мазки немедленно обмывают водой, высушивают и исследуют. При недостаточном обесцвечивании мазка эту процедуру повторяют.

За пироплазмид (здесь мы интерпретируем не только бабезиид, а представителей всего отряда Piroplasmida) принимаются лишь те объекты, которые имеют соответствующую форму, типично окрашены и располагаются внутри эритроцита; последнее устанавливают при подъёме тубуса микроскопа - объект признаётся внутриэритроцитарным при одновременном исчезновении его и эритроцита из поля зрения.

Пироплазмиды, как и другие кровепаразиты, окраску воспринимают дифференцированно, то есть восприятие окраски у ядер и протоплазмы не одинаково. Инородные образования окрашиваются, как правило, однородно и часто дают металлический отблеск.

Каждую обнаруженную форму квалифицируют как эндоглобу-лярное простейшее. К числу дифференциально-диагностических признаков пироплазмид относятся:

1)    определённый состав форм, присущих паразиту;

2)    наличие характерных конечных форм деления (двойные грушевидные у бабезиид, мальтийский крест у нутталлий, гранатные тела у тейлерий);

3)    доминирующий угол расхождения у двойных (парных) грушевидных форм (острый или тупой);

4)  преобладающее местоположение паразита в эритроците (центральное или периферическое);

5)    длина парных грушевидных форм по сравнению с радиусом эритроцита (больше или меньше радиуса);

6)    количество хроматиновых скоплений в паразите (одно, два и более);

7)    степень поражённости эритроцитов паразитами (путём подсчёта их числа в ста полях зрения микроскопа), выраженная в процентах.

При микроскопии мазков крови необходимо дифференцировать анаплазмоидные формы некоторых пироплазмид от имитирующих непротозойных образований, от посторонних включений и всевозможных артефактов. Среди них:

1)    тельца Жолли - круглые или овальные образования, окрашивающиеся в интенсивный сине- или темно-фиолетовый цвет, реже в ярко-красный; располагаются в протоплазме эритроцитов большей частью одиночно, иногда с двумя-тремя тельцами или в виде мелкой зернистости;

2)    базофильная зернистость (пунктуация) - представлена в виде мелких, различной величины и формы включений тёмно-синего цвета, в беспорядке разбросанных по всей площади эритроцита и хорошо заметных на розовом его фоне;

3)    кровяные пластинки (тромбоциты) выглядят как кусочки протоплазмы без ядра, овальной или круглой формы, окрашенные в розовый цвет, содержат небольшое количество зёрнышек; находятся не в эритроцитах, а в плазме крови.

При микроскопии мазков обращается внимание на изменения качественного состава крови: анизацитоз, полихромазия, пойкилоцитоз, в лейкоцитарной формуле сдвиг влево.

Кроме микроскопии мазков крови в лабораторной практике используются и серологические методы диагностики РСК, РДСК, РНГА, РИФ, ИФА.

Семейство Theileriidae

Передача инвазии осуществляется клещами трансфазно; преэритроцитарные многоядерные стадии в позвоночном хозяине имеются, развиваются в клетках лимфатической системы.

Род Theileria. Эритроцитарные стадии (мерозоиты) тейлерий отличаются разнообразием форм. Они, как правило, мелких размеров (0,5-2 мкм), чаще округлой или палочковидной формы, в одном эритроците от 1 до 9 паразитов. В России тейлерии как возбудители болезней паразитируют у крупного рогатого скота, у овец и коз, у северных оленей и лошадей.

Т. annulata - паразитирует у крупного рогатого скота. В эритроцитах встречаются паразиты круглой, овальной, запятовиднои, палочковидной, крестообразной (делящиеся стадии) и точечной формы. В паразитах овальной формы хроматин располагается в виде одного скопления по периферии, иногда как бы выступая за пределы цитоплазмы; такие формы напоминают перстень. В продолговатых формах хроматин концентрируется на утолщенном конце, напоминая шляпку гриба. Размеры тейлерий - от 0,5 до 2,9 мкм (прил., рис. 8).

В одном эритроците чаще 2-3 паразита, но может быть и более - до 9. Паразитемия на пике развития достигает 80-95 %.

Т. mutans (Т. orientalis) - паразитирует у крупного рогатого скота. Эритроцитарные стадии чаще округлые или овальные, реже -грушевидной, запятовидной или точковидной формы. Размеры в пределах 0,6-2 мкм.

В одном эритроците 2-4 паразита. Пораженность эритроцитов варьирует от 0,5 до 13 %. Вид слабо патогенен.

Т. sergenti - паразитирует у крупного рогатого скота. Эритроцитарные стадии палочковидные, овальные, грушевидные, крестовидные или точечные. Количество хроматиновых масс в одном паразите варьирует от 1 до 4. Размеры тейлерий от 0,5 до 3,1 мкм.

В одном эритроците до 7 паразитов. Зараженность эритроцитов тейлериями достигает 80-90 %, в среднем 40-50 %.

Т. equi (Nuttallia equi) - паразитирует у однокопытных (лошадь, осел, мул). Эритроцитарные стадии имеют преимущественно кольцевидную, овальную, круглую и грушевидную формы; последние встречаются редко и никогда не располагаются парами. Размножаются тейлерий почкованием с формированием характерных стадий, состоящих из 4 особей, соединенных цитоплазматическими мостиками («мальтийский крест»), но количество их незначительно (прил., рис. 11). Размер тейлерий в зависимости от стадии болезни меняется: в начале заболевания паразиты крупного размера - равны или превышают радиус эритроцита (2,5-3,2 мкм), по мере выздоровления размер их уменьшается (средние - менее половины радиуса эритроцита, мелкие - 1/4 его радиуса).

В одном эритроците от 1 до 4 тейлерий, редко более (до 10), различной формы. Паразитемия достигает 50-60 %.

Т. hirci (Gonderia hirci) - паразитирует у овец и коз. Эритроци-тарные стадии круглые, овальные, продолговатые и точковидные; четырехъядерные стадии имеют форму креста. Размеры круглых форм от 0,6 до 2 мкм, продолговатых - около 1,6 мкм. Вид высоко патогенен, количество зараженных эритроцитов значительно и может достигать 95 %.

Т. ovis (Т. recondita) - паразитирует у овец и коз. Эритроцитарные стадии круглые, овальные, продолговатые и точковидные, размеры их в пределах 0,5-2 мкм. Вид мало патогенен, пораженность эритроцитов не превышает 2 %.

Т. tarandirangiferis - паразитирует у северных оленей. Эритроцитарные стадии палочковидные - прямые или изогнутые (диаметром 0,5 мкм), овальные (1,5-2 мкм) и грушевидные (редко встречающиеся) формы. Вид патогенен, но изучен слабо.

Развитие в организме позвоночных. «Спорозоиты» тейлерий после инокуляции клещом через кровь и лимфу проникают в клетки лимфатической системы (лимфоузлы, печень, селезенка и др.). Попав в клетку, паразиты округляются, растут и превращаются в трофозоиты. Из них путем множественного деления (шизогонии, мерогонии) образуются многоядерные стадии, состоящие из большого количества одноядерных форм - мерозоитов, которые поражают новые клетки. Многоядерные стадии развития тейлерий (шизонты, меронты) называются «коховские шары» или «гранатные тела» (прил., рис. 12). После нескольких шизогональных циклов образующиеся мерозоиты проникают в плазму крови, откуда - в эритроциты, где размножаются бинарным делением или почкованием. Интенсивность этого процесса у разных видов тейлериид неодинакова.

Развитие в клещах. Сведения о развитии тейлериид противоречивы. Они как о бесполом, так и половом размножении. На заключительном этапе развития образуется большое количество одноядерных стадий (спорозоитов-мерозоитов), которые переселяются в слюнные железы клеща и при инокуляции способны продолжить развитие в позвоночном хозяине. Тейлерииды передаются от одной фазы развития клещей к другой: заражаются тейлериями личинки или нимфы, а передают паразитов позвоночному хозяину соответственно либо нимфы, либо имаго.

Д и а г н о с т и к а. Для обнаружения тейлериид исследуют мазки крови и пунктат поверхностных лимфоузлов. Мазки крови готовят так же, как при бабезиидозах животных.

Для получения пунктата из лимфоузла шерсть в области его расположения выстригают, кожу протирают спиртом и смазывают настойкой йода. Оттянув лимфоузел рукой несколько вверх, удерживают его в этом положении большим и указательным пальцами другой руки. В глубь железы вводят стерильную иглу, надетую на шприц (5-10 мл), и постепенно, оттягивая поршень шприца, всасывают в иглу лимфу. Отъединяют шприц от иглы, извлекают ее из железы, а содержащийся в ней пунктат осторожно выдувают шприцом на предметное стекло и той же иглой распределяют равномерным тонким слоем по его поверхности; дают мазку подсохнуть, а затем фиксируют и красят по Романовскому - Гимза. Место прокола смазывают раствором йода.

При микроскопии пунктата обнаруживают стадии множественного деления тейлерий («коховские шары», «гранатные тела») в лимфоцитах, моноцитах и реже внеклеточно. Они круглой или овальной формы, размером в пределах 8-27 мкм. Ядерное вещество гранатных тел окрашено в рубиново-красный цвет, а протоплазма в синевато-голубой.

Для ранней диагностики и установления тейлерионосительства разработаны серологические методы диагностики (РСК, РДСК, РИФ) с антигенами, приготовленными из преэритроцитарных стадий («гранатных тел») или из эритроцитарных стадий тейлерий.

КОКЦИДИИДЫ - отряд Coccidiida

Это большая группа простейших - возбудителей болезней сельскохозяйственных, домашних животных и человека. Одни из них паразитируют в клетках, другие - в тканях хозяина. Данный отряд  состоит из трех семейств: Eimeriidae, Sarcocystidae и Cryptosporidiidae. У них сложный жизненный цикл, включающий бесполый (мерогония) и половой (гаметогония) способы размножения. Их развитие проходит как со сменой хозяев, так и без таковой и всегда сопровождается формированием ооцист.

Семейство Eimeriidae

Представители этого семейства - моноксенные (однохозяинные) паразиты. Им свойственна не только строгая специфичность к видам хозяев (животным и птицам), но и локализация в их организме. Эймерииды паразитируют главным образом в эпителиальных клетках тонкого (чаще) и толстого кишечника, лишь некоторые виды - в других органах.

В цикле развития эймерииды претерпевают три стадии: мерогонию (шизогонию) - множественное бесполое размножение, гаметогонию - половое размножение и спорогонию - образование спор. Первые две стадии развития происходят в организме хозяина (эндогенный цикл), а третья - во внешней среде (экзогенный цикл).

Из организма хозяина с фекалиями выделяются ооцисты эймериид. Это прозрачные образования с гладкой одно- или двуконтурной оболочкой, различного цвета (светло- и тёмно-коричневые, светло- и тёмно-жёлтые, оранжево-жёлтые, светло-серые, бесцветные и др.), различной формы (овальные, элипсовидные, круглые, яйцевидные, цилиндрические, грушевидные) и различного размера (в пределах 10-50 х 10-45 мкм). У отдельных видов эймериид на одном из полюсов ооцисты имеется шапочка, микропиле и полярная гранула.

Ооцисты, выведенные из организма хозяина, представляют собой расселительную стадию. Во внешней среде при наличии определённых условий (тепла, влаги и кислорода) развитие эймериид продолжается (спорогония): в ооцисте участки цитоплазмы обособляются - образуются споробласты, вокруг них формируется оболочка - они превращаются в спороцисты (споры), в которых развиваются спорозоиты.

Жизненный цикл эймериид, как и других представителей отряда Coccidiida, начинается с заражения хозяина, проглотившего ооцисту со спорами и заключёнными внутри них спорозоитами. Последние выходят из ооцисты и внедряются в эпителиальные клетки кишечника. После краткого периода роста и множественного деления (мерогония, шизогония) спорозоит превращается в многоядерную клетку (меронт, шизонт), в которой формируются мерозоиты. Созревшие мерозоиты отпочковываются и внедряются в эпителиальные клетки, давая начало новой генерации шизонтов. Размеры шизонтов и число отпочковавшихся от них мерозонтов различно. В среднем шизонты 20-30 мкм, число мерозоитов в них от нескольких десятков до нескольких сотен. Но встречаются и «гигантские» шизонты, например, у Eimeria bovis они достигают 300-400 мкм, с огромным количеством мерозоитов (до 120 тыс.).

Бесполое размножение повторяется несколько раз, после чего потенция мерозоитов меняется, давая начало не шизонтам, а гамонтам, то есть наступает момент полового размножения - гаметогонии.

При гаметогонии происходит дифференциация мерозоитов: одни преобразуются в макрогамонты, другие - в микрогамонты; первые продуцируют женские половые клетки (макрогаметы размером 10-90 мкм), вторые - мужские половые клетки (микрогаметы размером 5-8 мкм). Микрогаметы, снабжённые жгутиком, подвижны, проникают в макрогаметы, происходит их слияние с образованием зигот. Зиготы окружаются оболочками и превращаются в ооцисты. В дальнейшем ооцисты выходят из организма животного с фекалиями во внешнюю среду, где продолжается развитие паразитов (спорогония), о чём сказано выше.

В семействе Eimeriidae четыре рода: Eimeria, Isospora, Wenyonella и Tyzzeria. Эймерии двух последних родов паразитируют у водоплавающих птиц и на территории России не диагностируются.

Род Eimeria. Ооцисты содержат 4 спороцисты, в каждой споро-цисте по два спорозоита (прил., рис. 14).

Эймерии паразитируют практически у всех сельскохозяйственных, домашних и диких животных и птиц. Различные виды эймерий паразитируют в различных отделах кишечной трубки: одни - в тонком кишечнике, другие - в толстом кишечнике, третьи - и в том, и в другом отделах, четвёртые - и в кишечнике, и вне его. Благодаря узкой гостальной специфичности эймерий в организме одного вида хозяина могут паразитировать несколько специфичных для него видов эймерий.

Ниже мы приводим по видам животных общее число изученных эймерий (по М. В. Крылову, 1994), в том числе с указанием некоторых, наиболее распространённых видов на территории России (прил., рис. 16).

Крупный рогатый скот - 21, Е. bovis, E. zurni, E. cyllindrica. Овцы, козы - 19, Е. parva, E. intericata, E. ninaekohlyakimovi. Свиньи - 11, Е. spinosa, E. perminuta, E. scarba. Кролики - 11, Е. piriformes, E. magna, E. perforans, E. stieda - паразитируют в эпителиальных клетках желчных протоков печени. Верблюды - 5, Е. cameli. Северные олени - 5, Е. arctica, E. mayeri, E. tarandina. Лошади - 3, Е. salipedum, E. leuckarti, E. uniungulati. Собаки и кошки - 4, Е. canis, E. felina, E. cati. Куры - 8, Е. tenella, E. maxima, E. brunetti -все они паразитируют, как правило, в слепых отростках и реже в тонком кишечнике. Гуси - 9, Е. anseris, E. truncata, E. parvula - все они локализуются не только в эпителии кишечника, но и извитых канальцев почек. Утки - 5, Е. anatis. Индейки - 6, Е. meleagridis, E. meleagrimitis. Цесарки - 3, Е. numidae, E. grenieri. Перепел - 1.

Д и а г н о с т и к а. Фекалии животных и птиц исследуют используя флотационные методы по Фюллеборну и Дарлингу. С поверхности отстоявшейся жидкости металлической петлёй берут каплю или две, наносят на предметное стекло, покрывают покровным и смотрят под микроскопом при увеличении 140-280 раз и более. В поле зрения микроскопа обнаруживают неспорулированные ооцисты эймерии: единичные при субклиническом течении болезни, десятки и сотни при заболевании.

Видовую принадлежность эймерий определяют по строению и размерам спорулированных ооцист с помощью специальных таблиц.

Ооцисты эймерий следует отличать от яиц гельминтов, которые, как правило, крупнее, имеют другую форму и строение оболочки. Кроме того, в яйцах некоторых гельминтов заметны процессы дробления и даже личинки на разных стадиях развития.

При патолого-анатомическом вскрытии для исследования берут кишечное содержимое, соскобы слизистой пораженного участка кишки, казеозное содержимое фокусов некроза печени кролика или почки гуся, приготовляют раздавленные капли и нативные мазки для исследования; из мест поражения печени и почек с этой же целью приготовляют отпечатки (кляч-препараты). При микроскопии этих материалов обнаруживают различные стадии развития эймерий.

Иногда прибегают к культивированию ооцист: фекалии помещают в чашку Петри и оставляют в теплом и влажном месте. Чтобы предохранить фекалии от плесени и ускорить процесс споруляции ооцист, фекалии обрабатывают 5 %-ным раствором двухромовокислого калия или смешивают с мелко истолченным древесным углем. Исследование ведут до образования спорозоитов.

Род Isospora (Cystoisospora). Ооцисты содержат 2 спороцисты, в каждой спороцисте по 4 спорозоита (прил., рис. 15).

Описано 13 видов изоспор, паразитирующих у различных животных и человека. Наибольшее ветеринарное значение имеют возбудители изоспорозов плотоядных: у собак I. canis и I. ohioensis, у кошек I. felis и I. rivolta.

Жизненные циклы изоспор плотоядных отличаются от таковых у эймерий. Собаки и кошки заражаются при заглатывании спорулированных ооцист, выделяемых больными с фекалиями, или при поедании инвазированных факультативных хозяев. Эту роль выполняют грызуны (мыши, крысы, хомяки), как жертвы хищников. Заражаются они при заглатывании ооцист изоспор: вышедшие из них спорозоиты локализуются в лимфатических узлах и паренхиматозных органах, где формируются цистоподобные стадии, которые сохраняются на долгое время (до 2 лет). Дальнейшее развитие они совершают только в организме окончательного хозяина.

Д и а г н о с т и к а. Фекалии исследуют методом флотации (по Фюллеборну, Дарлингу и др.) с целью обнаружения ооцист изоспор в раздавленной капле (не менее 3 капель). Исследуют под микроскопом с объективами х 10 - х 90 и окуляром - х 10. У больных животных обнаруживают большое количество неспорулиро-ванных ооцист. Они выделяются в любое время года, однако значительно чаще их регистрируют летом. Ооцисты изоспор имеют двуконтурную оболочку без микропиле и остаточного тела; спорулируют во внешней среде.

При вскрытии трупов с пораженных участков тонкого, реже толстого кишечника делают глубокие соскобы слизистой. Готовят препараты в форме раздавленной капли и нативного мазка. Обнаруживают эндогенные стадии развития изоспор (меронты, мерозоиты, гаметы, ооцисты). В окрашенных препаратах у эндогенных форм ядро темно-синего цвета, цитоплазма - сине-розового.

Ветеринарные книги

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2018