14. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ НЕОРГАНИЧЕСКОГО МАГНИЯ В КРОВИ

Принцип метода. Магний с титановым желтым в щелочной среде образует оран-жево-красное соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна его кон-центрации.

Реактивы.

1. 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты. Берут 20 г ТХУ и растворяют в 80 мл дистиллированной воды.

2. 0,01%-ный раствор поливинилового спирта. Растворяют 100 мг в 1 л бидистил-лированной воде при подогревании. Реактив стоек.

3. 0,1%-ный раствор титанового желтого. Реактив готовится в день анализа на би-дистиллированной воде.

4. 2 н раствор едкого натра. Растворяют 80 г вещества в 1 л бидистиллированной воде.

5. Стандартный раствор магния. 0,168 г прокаленной окиси магния растворяют сначала в 2,5 мл концентрированной соляной кислот и доводят бидистиллированной во-дой в мерной колбе до 100 мл. В 1 мл раствора содержится 1 мг магния. Для построения калибровочной кривой готовят рабочий раствор. Из основного стандартного раствора бе-рут 1 мл и доводят в мерной колбе до 100 мл бидистиллированной водой. В 1 мл рабочего раствора содержится 0,01 мг магния.

Оборудование и аппаратура.

1. Фотоэлектроколориметр

2. Центрифуга.

3. Пробирки центрифужные.

4. Стаканчики химические на 50 мл по ГОСТ 25336-82.

5. Колбы мерные на 100 и 1000 мл по ГОСТ 1770.

6. Стеклянные палочки.

Материал для исследования.

Материалом для исследования служит безбелковый фильтрат крови, полученный путем смешивания и последующего центрифугирования гепаринизированной крови и 20%-ного раствора ТХУ в равных объемах.

Ход определения.

1. Вносят в стаканчик 0,5 мл безбелкового фильтрата крови, добавляют 1 мл 0,01%-ного раствора титанового желтого, 1 мл 0,01%-ного раствора поливинилового спирта, 15,5 мл бидистиллированной воды и 2 мл 2 н раствора едкого натра.

2. Тщательно перемешивают стеклянной палочкой и через 6-10 минут фотометри-руют при зеленом светофильтре в кювете с толщиной слоя 5 см против контроля.

3. В контрольную пробу вместо 0,5 мл фильтрата крови вносят 0,25 мл бидистил-лированной воды и 0,25 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, далее по п. 1.

Расчет результатов.

1. По результатам измерений стандартных растворов магния вычерчивают калиб-ровочную кривую.

2. Берут 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,75; 1,0 мл рабочего стандартного раствора магния, анализируют, как и образцы крови. Общий объём до 20 мл доводят бидистиллированной водой.

3. Расчет производят по формуле:

39

где

а  - количество магния в мг по калибровочной кривой;

v  - количество мл безбелкового фильтрата крови, взятого на анализ;

2  - степень разведения крови;

100 - пересчет на 100 мл крови.

4. При v = 0,5 мл формула расчета следующая:

Mg (мМ/л) = а  164,4

Пример: показания ФЭК соответствуют 0,002 мг магния по калибровочной кри-вой. Отсюда содержание неорганического магния в крови будет 0,002  164,4 = 0,329 мМ/л.

ЗНАЧЕНИЕ. Содержание неорганического магния в крови здоровых животных представлено в таблице 2.

Снижение содержания неорганического магния в крови (гипомагнемия) наблюда-ется при дефиците магния в организме, пастбищной тетании.

Повышение уровня неорганического магния в крови (гипермагнемия) бывает ред-ко, например, при отравлениях солями магния.

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2021