3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

Принцип метода. В основе метода лежит способность сыворотки крови прелом-лять проходящий через неё свет. Коэффициент преломления соответствует содержанию белка в сыворотке крови.

Реактивы.

1. Спирт этиловый 96%-ный (ректификат) по ГОСТ Р 51652-2000.

2. Вода бидистиллированная.

Количество необходимых реактивов на 100 анализов.

1. Спирт этиловый   - 200 мл

2. Вода бидистиллированная - 10 мл

Оборудование и аппаратура.

1. Рефрактометр.

2. Унипипетка на 50 мкл и наконечники к ней.

3. Салфетки из бязи или батиста.

Материал для исследования.

Материалом для исследования служит негемолизированная сыворотка крови.

Ход определения.

Перед началом работы проверяют правильность установки рефрактометра на ноль, для чего выполняют следующие операции:

- установить рефрактометр против источника света, открыть зеркало шкалы коэф-фициентов преломления и осветительное окошко верхней призмы, отрегулировать рав-номерность освещения поля зрения;

- открыть измерительную призму и протереть её салфеткой, смоченной спиртом (расход спирта 0,5 мл на пробу);

- нанести на нижнюю измерительную призму несколько капель воды, закрыть крышку призмы;

- ручкой, расположенной справа установить окрашенность границы светотени (контрастность);

- ручкой, расположенной слева установить вертикальную линию в нижней части поля зрения окуляра на коэффициент П = 1,3330 (точно!), далее специальным ключом из комплекса ЗИП прибора вращают регулировочный винт до установки границы линии светотени на середину креста в верхней части поля зрения;

- проверяют правильность установки.

Протирают призму салфеткой, смоченной спиртом и затем сухой. Наносят на нижнюю призму 50 мкл сыворотки крови, закрывают призму, ручкой, расположенной на рефрактометре слева устанавливают границу светотени в середине креста, по нижней шкале снимают показания.

Измерение повторяют 2-3 раза.

Расчет результатов.

Проводят по таблице Рейса, а концентрацию белка выражают в г/л.

ЗНАЧЕНИЕ. Определение общего белка в сыворотке крови даёт представление об уровне белкового питания и помогает диагностировать гепатопатию и нефропатию. Со-держание белка в крови здоровых животных - стабильно. Отклонения уровня белка от нормы свидетельствует о глубоких нарушениях обмена веществ в организме животных.

Снижение общего белка (гипопротеинемия) отмечают при длительном недокорме животных (белковом голодании), алиментарной остеодистрофии, уровской болезни, ги-покобальтозе, энзоотическом зобе, хронических расстройствах ЖКТ, из-за чего плохо усваивается протеин, при нефрите и нефрозе, циррозе печени, туберкулезе и других бо-лезнях, а также при дефиците углеводов, макро- и микроэлементов, витаминов в рационе.

Повышение (гиперпротеинемия) бывает при высококонцентратном типе кормле-ния (белковый перекорм), кетозе, вторичной остеодистрофии, токсикозах и других болез-нях, сопровождающихся дистрофией, при тяжелых формах диареи, дегидратации орга-низма, острых воспалительных процессах, флегмоне, сепсисе, при заболевании печени (гепатиты, дистрофия), ЖКТ.

Таблица Рейса

Содержание белка в сыворотке крови  в зависимости от коэффициента рефрактации

Показания рефракто­метра

Белок, г/л

Показания рефракто­метра

Белок, г/л

Показания

рефракто-метра

Белок, г/л

1,3450

52,5

1,3480

70,0

1,3510

87,4

1,3451

53,1

1,3481

70,5

1,3511

88,0

1,3452

53,7

1,3482

71,1

1,3512

88,6

1,3453

54,3

1,3483

71,7

1,3513

89,1

1,3454

54,8

1,3484

72,3

1,3514

89,7

1,3456

55,4

1,3485

72,9

1,3515

90,3

1,3456

56,0

1,3486

73,4

1,3516

90,9

1,3457

56,6

1,3487

74,0

1,3517

91,5

1,3458

57,2

1,3488

74,6

1,3518

92,0

1,3459

57,7

1,3489

75,2

1,3519

92,5

1,3460

58,3

1,3490

75,8

1,3520

93,2

1,3461

58,9

1,3491

76,3

1,3521

93,8

1,3462

59,5

1,3492

76,9

1,3522

94,4

1,3463

60,1

1,3493

77,5

1,3523

95,0

1,3464

60,7

1,3494

78,1

1,3524

95,5

1,3465

61,2

1,3495

78,7

1,3525

96,1

1,3466

61,8

1,3496

79,3

1,3526

96,7

1,3467

62,4

1,3497

79,8

1,3527

97,3

1,3468

63,0

1,3498

80,4

1,3528

97,9

1,3469

63,6

1,3499

81,0

1,3529

98,4

1,3470

64,1

1,3500

81,6

1,3530

99,0

1,3471

64,7

1,3501

82,2

1,3531

99,6

1,3472

65,3

1,3502

82,7

1,3532

10,02

1,3473

65,9

1,3503

83,3

1,3533

10,08

1,3474

66,5

1,3504

83,9

1,3534

10,13

1,3475

67,0

1,3505

84,6

1,3535

10,19

1,3476

67,6

1,3506

85,1

1,3536

10,25

1,3477

68,2

1,3507

85,7

1,3537

10,31

1,3478

68,8

1,3508

86,2

1,3538

10,37

1,3479

69,4

1,3509

86,8

1,3539

10,43

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2021