Окраска микроорганизмов, метод бактериологического исследования, применяемый для обнаружения и изучения микробов при микроскопировании препаратов. Последние могут быть приготовлены из культур микробов или нативного материала - тканей органов, крови, мокроты, мочи, фекалий, гноя, молока и других (См. Бактериологическое исследование).

Окраска микроорганизмов - сложный физико-химический процесс, при котором существенную роль играют pH среды, адсорбция, капиллярные явления, электрический заряд и химический состав красителя и окрашиваемых объектов. Эти факторы определяют взаимодействие отдельных структур микробной клетки с тем или иным красителем. На результаты окраски микроорганизмов оказывают влияние физиологическое состояние микробов, способ приготовления препарата и метод окраски. Для окраски микроорганизмов применяют анилиновые красители, большая часть которых - соли кислот или оснований, поэтому эти красители, в свою очередь, подразделяются на основные и кислые. Для окраски микроорганизмов применяют главным образом основные красители, так как они быстрее фиксируются микробной клеткой. Кислые красители используют преимущественно для окрашивания фона препарата в контрастный цвет. Существуют также нейтральные красители (краска Романовского - Гимзы). В микробиологической практике наиболее употребительны анилиновые красители: красные - основной фуксин, сафранин, нейтральный красный, конго красный; синие - метиленовый синий, толуидиновый синий, опаловый синий; фиолетовые - метил фиолетовый, кристаллический фиолетовый, генциан фиолетовый, фиолетовый Гофмана; зелёный - малахитовый зелёный, бриллиантовый зелёный; жёлто-коричневые - везувин, хризоидин. Из красителей готовят водные или спиртово-водные растворы. Для улучшения красящей способности некоторых красителей к растворам добавляют фенол, едкий калий, буру и др. Приготовление рабочих растворов проводят по определённым прописям.

Окраску производят как живых (витальная окраска), так и убитых микробов, фиксированных на предметном стекле. Для витальной окраски микроорганизмов готовят препараты раздавленной или висячей капли; краситель разводят в физиологическом растворе хлорида натрия (1 : 10 000-1 : 100 000). Живые микроорганизмы окрашиваются плохо, поэтому наиболее распространена окраска убитых микробов. Окраску микроорганизмов проводят простым и сложным методами. При простом методе применяют какой-либо один краситель в рабочем растворе, которым окрашивают препарат в течение 1-2 мин; затем краску смывают дистиллированной водой и высушивают препарат фильтровальной бумагой. Микробы окрашиваются в цвет используемого красителя. При сложном методе используют 2 красителя (основной и дополнительный) и различные реактивы. Этот метод позволяет отличить одну группу микробов от другой, выявить отдельные элементы микробной клетки (споры) или химические вещества цитоплазмы (зёрна волютина, нуклеотиды). К сложным методам окраски микроорганизмов относят: окраску по Граму, окраску кислотоустойчивых микробов (методы Циля - Нельсена и др.), спор микробов (методы Ожешко, Пешкова, Мюллера и др.), зёрен волютина (методы Нейссера, Мейера), нуклеотидов (метод Фейльгена) и др. Во всех этих позитивных методах красители действуют непосредственно на микробную клетку. Существуют и негативные методы окраски микроорганизмов, основанные на окрашивании фона препарата, на котором контрастно видны непрокрашенные микробы. Эти методы применяют в тех случаях, когда изучаемые микроорганизмы (например, спирохеты) или отдельные элементы микробной клетки (например, капсула) плохо окрашиваются. В некоторых случаях используют комбинированные методы окраски микроорганизмов, включающие позитивный и негативный способы окраски (метод Гинса для обнаружения капсул). Широкое распространение получили флюоресцентные красители, соединённые с сывороткой, содержащей антитела против микроба определённого вида, благодаря чему при люминесцентной микроскопии происходит свечение этих микробных клеток. См. также Микроскопия.

Выберите букву

Статистика

Вверх

© Ветеринария 2018